RT-LAMP Kolormetrika (Liofiligita pilko)
Ĉi tiu produkto enhavas reagbufferon, RT-Enzymes Mix (Bst DNA-polimerazo kaj varmorezista inversa transkriptazo), liofiligitaj protektantoj kaj kromogenaj tinkturfarboj komponantoj.La produkto estas liofiligita pilka tipo, uzata nur kun enkondukoj kaj ŝablonoj.Ĉi tiu ilaro disponigas rapidan, klaran vidan detekton de plifortigo, kiu negativa reago estas indikita en ruĝa kaj pozitiva reago estas indikita per ŝanĝo al flava.
Komponanto
RT-LAMP Kolormetrika Majstra Miksaĵo (Liofiligitaj bidoj)
Aplikoj
Por DNA aŭ RNA izoterma plifortigo.
Kondiĉoj de Stokado
Transportita kaj stokita je 2 ~ 8 ℃.La produkto validas dum 12 monatoj.
Protokolo
1.Elprenu la respondan nombron Liofiligitaj bidoj-pulvoro laŭ la nombro da testoj.
2.Preparu reakcian miksaĵon
Komponanto | Volumo |
RT-LAMP Kolormetrika Majstra Miksaĵo (Liofiligitaj bidoj) | 1 peco (2 bidoj) |
10 × Unua Miksaĵoa | 5 μL |
Ŝablonoj DNA/ RNA b | 45 μL |
Notoj:
1. 10×Primer Mix-Koncentriĝo: 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM Loop F/B;
2. Nukleacidaj ŝablonoj rekomendas esti solvitaj per DEPC-akvo.
3.Kovu je 65 °C dum 30-45 minutoj, kiu povas esti etendita taŭge laŭ kolorŝanĝo Reagtempo.
4.Laŭ la nuda okulo, flava estis pozitiva kaj ruĝa estis negativa.
Notoj
1.La reagtemperaturo povas esti optimumigita inter 62 ℃ kaj 68 ℃ laŭ la unua kondiĉo.
2.La pakitaj reakciiloj ne devas esti elmontritaj al aero dum longa tempo.
3.La reago de ruĝa kaj flava senkoloriĝo dependas de la ŝanĝo de pH de la reagsistemo, bonvolu ne uzi la enhavan solvon de stokado de nuklea acido Tris, rekomendita uzi ddH.2O stokita nuklea acido.
4.La eksperimento devas esti farita en normigita maniero, inkluzive de la preparado de reagsistemo, specimena traktado kaj specimena aldono.
5.Oni sugestas prepari reagsistemon en la ultra-pura tablo kaj aldoni ŝablonojn en la fumkapuĉo de aliaj ĉambroj por eviti malverajn.