DNase I (Rnase Libera) (2u/ul)
Kato-N-ro: HC4007B
DNase I estas endonukleazo kiu povas digesti unu- aŭ duoble-fadenan DNA.Ĝi povas hidrolizi fosfodiesterajn ligojn por produkti mono- kaj oligodeoksinucleotidojn enhavantajn 5'-fosfatan grupon kaj 3'-OH-grupon.La optimuma funkcia pH-intervalo de DNase I estas 7-8.La agado de DNazo I dependas de Ca2+kaj povas esti aktivigita per divalentaj metaljonoj kiel ekzemple CO2, Mn2+, Zn2+, ktp En la ĉeesto de Mg2+, DNase I povas hazarde fendi ajnan lokon de duoble-fadena DNA;Dum en la ĉeesto de Mn2+, DNase I povas fendi DNA-du-fadenan en la sama loko, formante malakrajn finojn aŭ gluiĝemajn finojn kun 1-2 nukleotidoj elstarantaj.Ĝi povas esti uzata por la prilaborado de diversaj RNA-provaĵoj.
Komponentoj
| Nomo | 1KU | 5KU |
| Rekombina DNaseI (RNazo-libera) | 500 μL | 5 × 500 μL |
| DNase I-Reagbufro (10×) | 1 ml | 5 × 1 ml |
Kondiĉoj de konservado
Ĉi tiu produkto devas esti konservita je -25 ~ -15 ℃ dum 2 jaroj.Bonvolu eviti ripetan frostig-degelon.
Instrukcioj
Aplikita al la forigo de DNA de RNA-provaĵoj nur por referenco.
1. Bonvolu uzi RNase-liberajn centrifugiltubojn kaj pipetkonsiletojn por prepari la sekvan reagsistemon:
| Komponentoj | Volumo (μL) |
| DNase I-Reagbufro (10×) | 1 |
| Rekombina DNaselo (RNazo-libera) | 1 |
| RNA | X |
| RNazo-libera ddH2O | Ĝis 10 |
2. La reagokondiĉoj estas jenaj: 37℃, post 15-30 minutoj, aldonu finan koncentriĝon de 2,5 mM EDTA-solvo kaj miksu bone, poste 65℃ dum 10 minutoj.La prilaborita ŝablono povas esti uzata por postaj RT-PCR aŭ RT-qPCR-eksperimentoj, ktp.
Notoj
1. DNase l estas sentema al fizika denaturado;Dum miksado, milde renversu la provtubon kajbone skuu, ne vigle skuu.
2. La enzimo devas esti konservita en glaciskatolo aŭ sur glacia bano kiam oni uzas, kaj estu konservita ĉe -20℃ tuj post uzo.
3. Ĉi tiu produkto estas nur por esploruzo.
4. Bonvolu operacii per laboratorio-manteloj kaj foruzeblaj gantoj, por via sekureco.
