Robustart Taq DNA Polymerase

Robustart Taq DNA Polymerase estas varma starta DNA-polimerazo.Ĉi tiu produkto povas ne nur pli bone malhelpi la nespecifan reagon kaŭzitan de la nespecifa kalciado de enkondukoj aŭ primer-agregado en la procezo de preparado kaj plifortigo de PCR-sistemo.Tial, ĝi havas bonegan specifecon kaj estas pli efika por la plifortigo de malaltaj koncentriĝaj ŝablonoj, kaj ĝi taŭgas por multipleksita PCR-amplifiga reago.Krome, ĉi tiu produkto havas tre bonan aplikeblecon, kaj stabilaj plifortigaj rezultoj povas esti akiritaj en malsamaj specoj de PCR-reagoj.

Komponentoj

1.5 U/μL Robustart Taq DNA-polimerazo

2.10 × PCR Buffer II (Mg²+ senpaga) (laŭvola)

3.25 mM MgCl₂(laŭvola)

* 10 × PCR Buffer II (Mg²+ senpaga) ne enhavas dNTP kaj Mg²+, bonvolu aldoni dNTP-ojn kaj MgCl₂kiam oni preparas la reagsistemon.

Rekomenditaj Aplikoj

1.Rapida plifortigo.

2.Multobla plifortigo.

3.Rekta plifortigo de sango, swabs, kaj aliaj specimenoj.

4.Detekto de spiraj malsanoj.

Kondiĉo de Stokado

-20 °C por longtempa konservado, devus esti bone miksita antaŭ uzo, evitu oftan frosto-degelon.

*Se precipitaĵo okazas post malvarmigo, ĝi estas normale;oni rekomendas ekvilibrigi al ĉambra temperaturo antaŭ miksado kaj uzo.

Unueca Difino

Unu aktiva unuo (U) estas difinita kiel la kvanto de enzimo kiu korpigas 10 nmol da deoksirribonukleotido en acid-nesolveblan materialon je 74 °C dum 30 minutoj uzante aktivigitan salmosperman DNA kiel ŝablono/primo.

Kontrolo de kvalito

1.SDS-PAGE elektroforetika pureco pli granda ol 98%.

2.Plifortiga sentemo, bat-al-loka kontrolo, stabileco.

3.Neniu eksogena nukleaza agado, neniu eksogena endonukleazo aŭ eksogena nukleazo poluado

Instrukcioj

Reago-Agordo

Notoj:

1) a.La bufro ne enhavas dNTP kaj Mg²+, bonvolu aldoni dNTP-ojn kaj MgCl₂kiam oni preparas la reagsistemon.

2) b.Se uzite por qPCR/qRT-PCR, fluoreskaj enketoj devus esti aldonitaj al la reagsistemo.Kutime, fina primerkoncentriĝo de 0.2 μM donos bonajn rezultojn;se la reago agado estas malbona, la unua koncentriĝo povas esti ĝustigita en la gamo de 0.2-1 μM.La sonda koncentriĝo estas kutime optimumigita en la intervalo de 0.1-0.3 μM.Eksperimentoj pri koncentriĝgradiento povas esti faritaj por trovi la plej bonan kombinaĵon de enkonduko kaj sondilo.

Protokolo pri termika biciklado

Notoj

1.La plifortigo de rapida DNA-polimerazo ne devus esti malpli ol 1 kb/10 s.La temperaturo-pliiĝo kaj falo-indico, temperaturkontrola reĝimo kaj varmokonduka efikeco de malsamaj PCR-instrumentoj multe varias, do rekomendas optimumigi la optimumajn reagkondiĉojn por la specifa rapida PCR-instrumento.

2.La sistemo estas tre adaptebla, kun pli alta specifeco kaj sentemo.

3.Taŭga por uzo kiel alta sentiveca PCR-detekto reakciiloj, kaj povas esti uzata en multipleksaj PCR-amplifigaj reagoj.

4.5′→3′ polimeraza aktiveco, 5′→3′ eksonukleaza aktiveco;neniu 3′→5′ eksonukleaza aktiveco;neniu provlega funkcio.

5.Taŭga por kvalita kaj kvanta testado de PCR kaj RT-PCR.

6.La 3′ fino de la PCR-produkto estas A, kiu povas esti rekte klonita en T-vektoron.

7.La tri-ŝtupa metodo estas rekomendita por enkondukoj kun malaltaj kalciaj temperaturoj aŭ por plifortigo de fragmentoj pli longaj ol 200 bp.