Multeksa qPCR Probe Premix
Kato-N-ro: HCB5051A
TaqMan multiplex qPCR Master Mix (Dye Based) estas antaŭsolvo por 2 × realtempa kvanta PCR-amplifilo karakterizita per alta sentemo kaj specifeco, kiu estas blua koloro, kaj havas la efikon de specimena aldono.Ĉi tiu produkto estas 2× Mix antaŭmiksita reakciilo kiu ebligas ĝis kvar fluoreskaj kvantaj PCR-reagoj en ununura reakcio.Ĉi tiu produkto enhavas la genetike modifitan antikorpan metodon al varma starta Taq-enzimo, multe plibonigante la plifortigan sentemon kaj specifecon.Samtempe, ĉi tiu produkto profunde optimumigis la mult-reagan bufron, kiu povas plibonigi la plifortigan efikecon de la reago kaj antaŭenigi la efikan plifortigon de malaltaj koncentriĝaj ŝablonoj.Ĉi tiu produkto povas esti uzata por genotipado kaj plurkvanta kvanta analizo.
Specifo
| Varma Komenco | Enkonstruita varma starto |
| Detekta metodo | Primer-sonda detekto |
| PCR-metodo | qPCR |
| Polimerazo | Taq DNA-polimerazo |
| Tipo de specimeno | DNA |
Kondiĉoj de Stokado
La produkto estas sendita kun seka glacio kaj povas esti konservita je -25 ~ -15 ℃ dum 2 jaroj.
Instrukcioj
1. ReagoSistemo
| Komponentoj | Volumo (μL) | Fina Koncentriĝo |
| 2× TaqMan-multiplex qPCR Master Mix | 12.5 | 1× |
| Unua miksaĵo (10 μmol/L) a | × | 0,1 - 0,5 μmol/L |
| Sonda miksaĵo (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| Rox-referenca tinkturfarbo | 0.5 | 1× |
| Ŝablono DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | ĝis 25 | - |
Notoj:Miksu plene antaŭ uzo por eviti troajn vezikojn de forta skuado.
a.Primer-koncentriĝo: Primer-Miksaĵo enhavas multoblajn parojn da enkondukoj, kutime ĉiu enkonduko je fina koncentriĝo de 0.2 μmol/L kaj ankaŭ povas esti alĝustigita inter 0.1 kaj 0.5 μmol/L kiel konvene.
b.Sonda koncentriĝo: Sonda Miksaĵo enhavas plurajn sondilojn kun malsamaj fluoreskecaj signaloj, kaj la koncentriĝo de ĉiu enketo povas esti ĝustigita inter 50 kaj 250 nmol/L laŭ specifa situacio.
1.Rox-tinkturfarbo-referenco: Ĝi estas uzata sur Real Time PCR-amplifiga instrumento kiel Applied Biosystems por korekti la eraron de fluoreskeca signalo generita inter putoj;ĉi tiu produkto ne enhavas referencon de tinkturfarbo Rox.Cas#10200 estas rekomendita se necese.
2.Ŝablonodiluo: qPCR estas tre sentema, kaj rekomendas dilui la ŝablonon por uzo.Se la ŝablono estas cDNA-akcia solvo, la ŝablonvolumeno ne devus superi 1/10 de la totala volumo.
3.Reagsistemo: 25μL, 30μL aŭ 50 μL estas rekomenditaj por certigi la efikecon kaj ripeteblon de cela gena plifortigo.
4.Sistempreparo: Bonvolu prepari en la superpura benko, kaj uzi la konsiletojn kaj reagajn tubojn sen nukleazaj restaĵoj;oni rekomendas uzi la konsiletojn kun filtrilaj kartoĉoj.Evitu krucan poluadon kaj aerosolan poluadon.
2.Programo de reago
| Cikla paŝo | Temp. | Tempo | Cikloj |
| Komenca-malnaturado | 95 ℃ | 5 minutoj | 1 |
| Denaturado | 95 ℃ | 15 sek | 45 |
| Kolcigado/Etendado | 60 ℃ | 30 sek |
Notoj:
1.Rekalado/Etendado: La temperaturo kaj tempo povas esti taŭge ĝustigitaj laŭ la desegnita enkonduka valoro Tm.
2.Akiro de fluoreskeca signalo: La tempo de akiraĵo de fluoreska signalo necesa por malsamaj qPCR-detektaj instrumentoj estas malsama, bonvolu agordi laŭ la minimuma tempolimo.La tempo de pluraj oftaj instrumentoj estas fiksita jene:
20 sek: Aplikataj Biosistemoj 7700, 7900HT, 7500 Rapida
31 sek: Aplikataj Biosistemoj 7300
32 sek: Aplikataj Biosistemoj 7500
Notoj
Bonvolu porti la necesan PPE, tiajn laboratoriomantelon kaj gantojn, por certigi vian sanon kaj sekurecon!
