Bst 2.0 DNA-polimerazo (sen glicerino, alta denseco)
Bst DNA-polimerazo V2 estas derivita de Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, kiu havas 5′→3′ DNA-polimerazan agadon kaj fortan ĉenan anstataŭigan agadon, sed neniun 5′→3′ eksonukleazaktivecon.Bst DNA Polymerase V2 estas ideale taŭga por faden-delokiĝo, izoterma amplifigado LAMP (Loop mediated izoterma amplificado) kaj rapida sekvencado.Ĉi tiu Bst DNA-polimerazo V2 kapablas malhelpi DNA-polimerazan agadon ĉe ĉambra temperaturo, tiel ke ĝi povas esti funkciigita kaj la reagsistemo povas esti formulita ĉe ĉambra temperaturo, malhelpante nespecifan plifortigon kaj plibonigante la efikecon de la reago, kaj ĉi tiu versio povas esti liofiligita.Krome, ĝi kapablas liberigi sian agadon ĉe altaj temperaturoj, tiel forigante la bezonon de aparta aktiviga paŝo.
Komponentoj
| Komponanto | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
| Bst DNA-polimerazo V2 (senglicerino) (32U/μL) | 0,05 ml | 0,25 ml | 2,5 ml |
| 10×HC Bst V2 Bufro | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 3 × 10 ml |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 ml | 2 × 1,5 ml | 2 × 10 ml |
Aplikoj
1.LAMP-izoterma plifortigo
2.DNA-fadeno ununura delokiĝoreago
3.Alta GC-gensekvencado
4.DNA-sekvencado de nanogramnivelo.
Kondiĉo de Stokado
Transportado sub 0 °C kaj stokita je -25 °C ~ -15 °C.
Unueca Difino
Unu unuo estas difinita kiel la kvanto de enzimo kiu korpigas 25 nmol de dNTP en acidan nesolveblan materialon en 30 minutoj je 65 °C.
LAMPA Reago
| Komponentoj | 25 μLSistemo |
| 10×HC Bst V2 Bufro | 2,5 μL |
| MgSO4 (100 mM) | 1,5 μL |
| dNTP-oj (10 mM ĉiu) | 3,5 μL |
| SYTO™ 16 Verda (25×)a | 1,0 μL |
| Unua miksaĵob | 6 μL |
| Bst DNA Polymerase V2 (senglicerino) (32 U/uL) | 0,25 μL |
| Ŝablono | × μL |
| ddH₂O | Ĝis 25 μL |
Notoj:
1) a.SYTOTM 16 Verda (25×): Laŭ eksperimentaj bezonoj, aliaj tinkturfarboj povas esti uzataj kiel anstataŭaĵoj;
2) b.Primer-miksaĵo: akirita per miksado de 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB kaj aliaj volumoj.
Reago kaj Kondiĉo
1 × HC Bst V2 Buffer, la inkubacia temperaturo estas inter 60 °C kaj 65 °C.
Malaktivigo de Varmo
80 °C, 20 minutoj.
