Ultra Nuclease GMP-grado
Kato No: HC2016A
UltraNuclease GMP-grado estas esprimita kaj purigita en Escherichia coli (E.coli) per genetike realigita kaj preparita sub la GMP-medioj.Ĝi povas redukti la viskozecon de ĉela supernatante kaj ĉela lisato en scienca esplorado, pliigi proteinan purigan efikecon kaj plibonigi proteinan funkcian esploradon.La produkto ankaŭ povas redukti gastigajn nukleacidajn restaĵojn al pg-grado, plibonigante la agadon kaj sekurecon de biologiaj produktoj de aplikoj inkluzive de viruspurigo, vakcina fabrikado kaj proteino/polisakarida farmacia fabrikado.Krome, la produkto ankaŭ povas esti aplikita por malhelpi la amasiĝon de homaj periferiaj sango-mononukleaj ĉeloj (PBMC) en ĉelterapio kaj vakcina evoluo.
UltraNuclease estas provizita en formo de steriligita reakciilo, eluita en bufro (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerino), kun aspekto de senkolora, travidebla likvaĵo.Ĉi tiu produkto estas produktita de GMP-procezaj postuloj kaj provizita en likva formo.
Komponentoj
UltraNuclease GMP-grado (250 U/μL)
Kondiĉoj de Stokado
La produkto estas sendita kun seka glacio kaj povas esti stokita je -25 ℃ ~ -15 ° C dum du jaroj.
Se la produkto estas malfermita kaj konservita je 4℃ dum pli ol semajno, ni rekomendas filtri.la produkto por malhelpi mikroban poluadon.
Specifoj
| Esprimo Gastiganto | Rekombina E. coli kun UltraNuclease geno |
| Molekula pezo | 26,5 kDa |
| soelektra punkto | 6.85 |
| Pureco | ≥99% (SDS-PAĜO) |
| Stokado Buffer | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glicerino |
|
Unueca Difino | La difino de unu Agadunuo (U) estas la kvanto de enzimo uzata alŝanĝi la absorban valoron de ΔA260 je 1.0 en 30 minutoj en 2. 625 mLreagsistemo je 37℃ kun pH de 8.0 (ekvivalenta al kompleta digestado de37 μg salma spermo DNA en oligonukleotidojn). |
Instrukcioj
1. Specimeno Kolekto
Adheraj ĉeloj: forigu la medion, lavu la ĉelojn kun PBS, kaj forigu la supernatante.
Pendaj ĉeloj: kolektu la ĉelojn per centrifugado, lavu la ĉelojn per PBS, centrifugu je 6,000rpm dum 10 minutoj, kolektu la buleton.
Escherichia coli: kolektu la bakteriojn per centrifugado, lavu unufoje per PBS, centrifugu je 8,000rpm dum 5 minutoj, kaj kolektu la buleton.
2. Specimena Traktado
Traktu la kolektitajn ĉelbulletojn kun lizobufro laŭ la proporcio de maso (g) al volumeno (mL) 1: (10-20), aŭ per mekanikaj aŭ kemiaj metodoj sur glacio aŭ ĉe ĉambra temperaturo (1g da ĉelbuleto enhavas ĉirkaŭ.
109 ĉeloj).
3. Enzima Traktado
Aldonu 1-5mM MgCl al la reagsistemo kaj ĝustigu la pH al 8-9.
Aldonu UltraNuclease laŭ la proporcio de 250 Unuoj por digesti 1 g da ĉelaj buletoj, kovu je 37℃ dum pli ol 30 minutoj.Bonvolu raporti al la formularo "Rekomendita Reagotempo" por elekti ladaŭro de la traktado.
4. Supernatant Kolekto
Centrifugu je 12,000 rpm dum 30 minutoj kaj kolektu la supernatante.
Noto: Se la solvo estas acida aŭ alkala, aŭ enhavas altajn koncentriĝojn de salo, lesivoj aŭdenaturantoj, bonvolu pliigi la enziman dozon aŭ plilongigi la kuractempon laŭe.
Rekomenditaj kondiĉoj de reagoons
| Parametro | Optimuma Kondiĉo | Efika Kondiĉo |
| Mg²+Koncentriĝo | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Temperaturo | 37℃ | 0-42℃ |
| TDT-Koncentriĝo | 0-100 mM | > 0 mM |
| Mercaptoethanol-Koncentriĝo | 0-100 mM | > 0 mM |
| Monovalenta katjonkoncentriĝo | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Fosfato lon Koncentriĝo | 0-10 mM | 0-100 mM |
Rekomendita Reago Tempo (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| UltraNuclease Kvanto (Fina Koncentriĝo) | Tempo de Reago |
| 0,25 U/mL | > 10 h |
| 2,5 U/ml | >4 h |
| 25 U/mL | 30 min |
Notoj:
Bonvolu porti la necesan PPE, tiajn laboratoriomantelon kaj gantojn, por certigi vian sanon kaj sekurecon!
