Fosfataza Alkala (ALP)
Priskribo
Alkala Fosfatazo estas derivita de rekombina E. coli trostreĉiĝo kiu portas la TAB5-genon.La enzimo katalizas la defosforiligo de 5' kaj 3' finoj de DNA kaj RNA-fosfomonoesteroj.Ankaŭ, ĝi hidrolizas ribozon, same kiel deoksiribonukleozidtrifosfatojn (NTPoj kaj dNTPoj).TAB5 Alkala Fosfatazo agas sur 5' elstarantaj, 5' enfositaj kaj malakraj finoj.La Fosfatazo povas esti uzita en multaj molekula biologiaj aplikoj, kiel ekzemple klonado aŭ sonda finetikedado por forigi la fosforilateitajn finojn de DNA aŭ RNA.En klonaj eksperimentoj, defosforiligo malhelpas la linearigitan plasmid DNA de mem-ligado.Ĝi ankaŭ povas degradi neasimilita dNTPojn en PCR-reagoj por prepari ŝablonon por DNA-sekvencado.La enzimo estas tute kaj nemaligeble malaktivigita per varmigado je 70 °C dum 5 minutoj, tiel igante forigon de la fosfatazo antaŭ ligado aŭ fina etikedado nenecesa.
Uzado
1.Alkala fosfatazo kunligita al proteinoj (antikorpoj, streptavidin ktp) povas specife identigi celajn molekulojn, kaj povas esti uzata en ELISA, WB kaj histokemia detekto;
2.Alkala fosfatazo povas esti uzata por malfosforigi la 5 '-finaĵon de DNA aŭ RNA por malhelpi mem-ligon;
3.La supre malfosforilata DNA aŭ RNA povas esti etikedita per radio-etikeditaj fosfatoj (per T4-poli-nukleotida kinazo)
Kemia Strukturo
Specifo
Testaj Eroj | Specifoj |
Enzima Aktiveco | 5U/μL |
Endonuclease Aktiveco | Ne detektita |
Eksonuclease Agado | Ne detektita |
Agado de Nicking | Ne detektita |
RNase-Agado | Ne detektita |
E.coli DNA | ≤1kopio/5U |
Endotoksino | LAL-testo, ≤10EU/mg |
Pureco | ≥95% |
Transportado kaj stokado
Transportado:AmbIento
Stokado:Konservu je 2-8 °C
Rekomendita retestoVivo:2 jaro