One Step Fast RT-qPCR Probe Premix-UNG
Kato-N-ro: HCR5143A
One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) estas enket-bazita RT-qPCR rapida detektkompleto taŭga por unu-pleksa aŭ plurkvanta kvanta PCR utiliganta RNA kiel ŝablonon (kiel ekzemple RNA-viruso).Ĉi tiu produkto uzas novan generacion de Taq DNA-Polimerazo modifita de antikorpo kaj unupaŝa dediĉita Reversa Transcriptase, kun optimumigita bufro por rapida plifortigo, kiu havas pli rapidan plifortigan rapidon, pli altan plifortigan efikecon kaj specifecon.Ĝi subtenas ekvilibran plifortigon en unu-plekso kaj multipleks de malaltaj kaj altaj koncentriĝaj specimenoj en mallonga tempo.
Komponentoj
1. 5×RT-qPCR-bufro (U+)
2. Enzima miksaĵo (U+)
Notoj:
a.5×RT-qPCR-bufro (U+) inkludas dNTP kaj Mg2+;
b.Enzimmiksaĵo (U+) inkludas inversan transkriptazon, Hot Start Taq DNA-polimerazon, RNase-inhibitoron kaj UDG;
c.Uzu RNase-Senajn konsiletojn, EP-tubojn, ktp.
Antaŭ uzo, plene miksu la 5×RT-qPCR-bufron (U+).Se estas iu precipitaĵo post degelo, atendu ke la bufro revenos al ĉambra temperaturo, miksu kaj solvu, kaj poste uzu ilin normale.
Kondiĉoj de Stokado
La produkto estas sendita kun seka glacio kaj povas esti konservita je -25 ~ -15 ℃ dum 1 jaro.
Instrukcioj
1. Reago Sistemo
| Komponentoj | Volumo (20 μL reago) |
| 2 ×RT-qPCR-bufro | 4μL |
| Enzimmiksaĵo (U+) | 0.8μL |
| Primer Antaŭen | 0.1 ~ 1.0μM |
| Primer Reverse | 0.1 ~ 1.0μM |
| TaqMan Probe | 0.05~0.25μM |
| Ŝablono | X μL |
| RNazo-Libera Akvo | ĝis 25μL |
Notoj: Reakcia volumo estas 10-50μL.
2. Bicikla Protokolo (Sstandardo)
| Ciklo paŝo | Temp. | Tempo | Cikloj |
| Inversa Transskribo | 55 ℃ | 10 min | 1 |
| Komenca Denaturado | 95 ℃ | 30 sek | 1 |
| Denaturado | 95 ℃ | 10 sek | 45 |
| Kolcigado/Etendado | 60 ℃ | 30 sek |
| Protokolo pri biciklado (Rapida) Ciklo paŝo |
Temp. |
Tempo |
Cikloj |
| Inversa Transskribo | 55 ℃ | 5 min | 1 |
| Komenca Denaturado | 95 ℃ | 5 s | 1 |
| Denaturado | 95 ℃ | 3 s | 43 |
| Kolcigado/Etendado | 60 ℃ | 10 s |
Notoj:
a.Inversa transskriba temperaturo estas inter 50 ℃ ĝis 60 ℃, pliigi la temperaturon helpas plifortigi kompleksajn strukturojn kaj ŝablonojn kun alta CG-enhavo;
b.La optimuma kalcia temperaturo devas esti ĝustigita surbaze de la Tm-valoro de la enkonduko, kaj elektu la plej mallongan tempon por fluoreskeca signalkolekto bazita sur la Real Time PCR-instrumento.
Notoj
Bonvolu porti la necesan PPE, tiajn laboratoriomantelon kaj gantojn, por certigi vian sanon kaj sekurecon!
