Multeksa Unu Paŝo RT-qPCR Premix
Priskribo
Kato-N-ro: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix estas plurkvanta kvanta PCR-ilaro bazita sur RNA kiel ŝablono.En la eksperimento, inversa transskribo kaj kvanta PCR estas faritaj en la sama reagtubo, simpligante la eksperimentan operacion kaj reduktante la riskon de poluado.La unika dezajno de bufro kaj enzimmiksaĵo povas esti uzata en unupaŝa liofiligita sistemo.La ilaro uzas varmorezistan Inversan Transskribazon por efika sintezo de unua fadeno cDNA uzante varman Taq DNA Polymerase por kvanta plifortigo.Ĝi enhavas optimumigitan reagan bufron, miksaĵon de enzimoj ktp., kaj faktoroj kiuj efike malhelpas nespecifan PCR-amplifilon kaj plibonigas la plifortigan efikecon de multoblaj qPCR-reagoj estis aldonitaj, ebligante multoblan fluoreskecan kvantan plifortigon dum certigante la plifortigan efikecon de enkondukoj.
Komponentoj
| Nomo |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzima Miksaĵo |
| 3. Lyoprotektanto |
Kondiĉo de transportadojono
R: Lio-bufro kaj protektanto: -25 ~ -15 ℃, bretodaŭro estas 1 jaro.
B: Lio-enzima miksaĵo, 2-8 ℃, bretodaŭro estas 6 monatoj.
Instrukcio por operacio
1. Reaga Sistemo (Prenu 25μL kiel ekzemplon)
| Komponentoj | Volumo (μL) | Fina Koncentriĝo |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Lio-enzima Miksaĵo | 1 | - |
| Lio-Protektanto | 8 | - |
| Unua Miksaĵo (10μM) | 1 | 0,1- 1uM |
| Sonda Miksaĵo (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| RNA-Ŝablono | 5 | - |
| DEPC H2O | Ĝis 25 | - |
2. Optimumigita Biciklada Protokolo
1) Norma Protokolo pri Biciklado
| Etapo de reago | Temperaturo | Tempo | Ciklo | |
| 1 | Inversa transskribo | 50°Ca | 10 min | 1 |
| 2 | Komenca denaturado | 95°C | 5 min | 1 |
| 3 | Plifortiga reago | 95°C | 15 sek | 45 cikloj |
| 60°Cb | 30 sekc |
2) Protokolo pri Rapida Biciklado
|
| Etapo de reago | Temperaturo | Tempo | Ciklo |
| 1 | Inversa transskribo | 50°Ca | 2 min | 1 |
| 2 | Komenca denaturado | 95°C | 2 sek | 1 |
| 3 | Plifortiga reago | 95°C | 1 sek |
45 cikloj |
| 60°Cb | 13 sekc |
Notu:
a) Reverse transskribo: La temperaturo povas elekti 42 °C aŭ 50 °C dum 10-15 minutoj.
b) Plifortiga reago: La temperaturo estas ĝustigita laŭ la Tm-valoro de la dezajnitaj enkondukoj.
c)Fluoresko signalo akiro: Bonvolu agordi la eksperimentan proceduron laŭ la postuloj de lamanlibro pri instrumento.
Teknikaj Informoj/Specifoj
| Varma Komenco | Enkonstruita varma starto |
| Detekta metodo | Primer-sonda detekto |
| PCR-metodo | Unu paŝo RT-qPCR |
| Tipo de specimeno | RNA |
Notoj
1. Ĉi tiu produkto estas nur por esploruzo.
2. Bonvolu porti la necesan PPE, tiajn laboratoriomantelon kaj gantojn, por certigi vian sanon kaj sekurecon!
