2×PCR Super Mix (kun Tinkturfarbo)
2× PCR Master Mix enhavas Taq DNA Polymerase, dNTPs, kaj aliajn PCR-postulatajn komponentojn.La Master Mix estas stabila dum 3 monatoj je 4℃ kun niaj personecigitaj stabiligiloj.La antaŭmiksaĵa solvo estas optimumigita por konvencia PCR kaj preta por uzi aldonante DNA-ŝablonon kaj enkondukojn.La PCR-produktoj povas esti ŝarĝitaj rekte por elektroforezo kun antaŭ-ŝarĝita bromofenola blua tinkturfarbo.La plifortigitaj produktoj enhavas 3'-dA protrusion kaj povas esti facile klonitaj en T-vektoron.La 2×PCR Master Mix simpligas PCR-proceduron kaj reduktas poluadon.
Kondiĉoj de Stokado
Produktoj devas esti konservitaj je -25 ℃ ~ -15 ℃ dum 2 jaroj.
Specifoj
| Fideleco (vs. Taq) | 1× |
| Varma Komenco | No |
| Superpendanto | 3 '-A |
| Polimerazo | Taq DNA-polimerazo |
| Formato de Reago | SuperMix aŭ Master Mix |
| Reago Rapido | Normo |
| Produkta Tipo | PCR Majstra Miksaĵo (2x) |
Instrukcioj
1.Reagsistemo
| Komponentoj | Volumo(μL) |
| Ŝablono DNA | Taŭga |
| Enkonduko 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Enkonduko 2 (10 μmol/L) | 2 |
| 2× PCR Majstra Miksaĵo | 25 |
| ddH2O | al 50 |
2.Plifortiga Protokolo
| Ciklaj paŝoj | Temperaturo (°C) | Tempo | Cikloj |
| Komenca denaturado | 94 | 5 min | 1 |
| Denaturado | 94 | 30 sek | 35 |
| Kolekti | 50-60 | 30 sek | |
| Etendo | 72 | 30-60 sek/kb | |
| Fina etendo | 72 | 10 min | 1 |
Notu:
1) Ŝablona uzado: 50-200ng genoma DNA;0.1-10ng plasmida DNA.
2) Mg2+koncentriĝo: Ĉi tiu produkto enhavas 3mM de MgCl2, taŭga por plej multaj PCR-reagoj.
3) Rekiga temperaturo: Bonvolu raporti al la teoria Tm-valoro de enkondukoj.La kalcia temperaturo povas esti agordita je 2-5 ℃ pli malalta ol la teoria valoro de la enkonduko.
4) Etenda tempo: Por molekula identigo, 30 sek/kb rekomendas.Por gena klonado rekomendas 60 sek/kb.
Notoj
1.PCR-produktoj kun 2× PCR Master Mix ne taŭgas por poliakrilamida ĝela elektroforezo.
2.Por via sekureco kaj sano, bonvolu porti laboratoriajn mantelojn kaj foruzeblajn gantojn por operacio.
3.Ĝi estas uzata NUR por esploruzo!
