2×PCR Majstra Miksaĵo (sen Tinkturfarbo)
PCR Master Mix estas speco de konvencia PCR-premiksita solvo, kiu estas preta uzi, inkluzive de Taq DNA Polymerase, dNTP-miksaĵo MgCl2 kaj optimumigita bufro.Dum la reago, nur la enkonduko kaj ŝablono povas esti aldonitaj por plifortigo, kio multe simpligas la operaciajn paŝojn de eksperimento.Ĉi tiu produkto enhavas bonegajn stabiligilojn kaj povas esti konservita dum 3 monatoj je 4℃.La PCR-produkto havas 3′-dA protrusion kaj povas esti facile klonita en T-vektoron.
Kondiĉoj de Stokado
La produkto devas esti konservita je -25 ℃ ~ -15 ℃ dum du jaroj.
Specifoj
| Fideleco (vs.Taq) | 1× |
| Varma Komenco | No |
| Superpendanto | 3′-A |
| Polimerazo | Taq DNA-polimerazo |
| Formato de Reago | SuperMix aŭ Master Mix |
| Reago Rapido | Normo |
| Produkta Tipo | PCR Majstra Miksaĵo (2×) |
Instrukcioj
1.Reagsistemo
| Komponentoj | Grandeco (μL) |
| Ŝablono DNA | Taŭga |
| Enkonduko 1 (10 μmol/L) | 2 |
| Enkonduko 2 (10 μmol/L) | 2 |
| PCR Majstra Miksaĵo | 25 |
| ddH2O | Al 50 |
2.Plifortiga Protokolo
| Ciklaj paŝoj | Temperaturo (°C) | Tempo | Cikloj |
| Antaŭ-malnaturado | 94 ℃ | 5 minutoj | 1 |
| Denaturado | 94 ℃ | 30 sek | 35 |
| Kolekti | 50-60 ℃ | 30 sek | |
| Etendo | 72 ℃ | 30-60 sek/kb | |
| Fina Etendo | 72 ℃ | 10 minutoj | 1 |
Notoj:
1) Ŝablona uzado: 50-200 ng genoma DNA;0,1-10 ng plasmida DNA.
2) Mg2+koncentriĝo: Ĉi tiu produkto enhavas 3 mM de MgCl2 taŭga por plej multaj PCR-reagoj.
3) Kuracia temperaturo: Bonvolu raporti al la teoria Tm-valoro de Primers.La kalcia temperaturo povas esti agordita je 2-5 ℃ pli malalta ol la teoria valoro de la enkonduko.
4) Etenda tempo: Por molekula identigo, 30 sek/kb rekomendas.Por genklonado, 60sek/kb estas rekomendinda.
Notoj
1.Por via sekureco kaj sano, bonvolu porti laboratoriajn mantelojn kaj foruzeblajn gantojn por operacio.
2.Nur por esploruzo!
